近日市場(chǎng)監(jiān)管總局批準(zhǔn)發(fā)布了《保健食品中西地那非和他達(dá)拉非的快速檢測(cè)-膠體金免疫層析法》（KJ201901），本方法規(guī)定了保健食品中西地那非和他達(dá)拉非的膠體金免疫層析快速篩查方法。

1 范圍

本方法適用于聲稱(chēng)具有抗疲勞、調(diào)節(jié)免疫等功能的保健食品中西地那非和他達(dá)拉非成分的快速篩查。

2 原理

本方法采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析原理。樣品中的西地那非和他達(dá)拉非等物質(zhì)經(jīng)提取后與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，抑制抗體和試紙條或檢測(cè)卡中檢測(cè)線（T線）上抗原的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色深淺的變化。通過(guò)檢測(cè)線與控制線（C線）顏色深淺比較，對(duì)樣品中西地那非和他達(dá)拉非成分進(jìn)行定性判定。

3 試劑材料

3.1 試劑

除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的二級(jí)水。

3.1.1 甲醇：色譜純。

3.1.2 三羥甲基氨基甲烷，Tris堿。

3.1.3 濃鹽酸。

3.1.4 吐溫-20。

3.1.5 鹽酸溶液：量取濃鹽酸（3.1.3）16.7 mL，用水溶解并稀釋至100 mL。

3.1.6 緩沖液：稱(chēng)取12.1 g Tris堿（3.1.2），加適量水溶解，混勻，用鹽酸溶液（3.1.5）調(diào)節(jié)pH至8.0，加入5.0 g吐溫-20（3.1.4）攪拌均勻，定容至1000 mL。

3.2 參考物質(zhì)

參考物質(zhì)的中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子量見(jiàn)表1，純度均≥99%。

注：或等同可溯源物質(zhì)。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

3.3.1 西地那非標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.0 mg/mL）：精密稱(chēng)取適量西地那非參考物質(zhì)（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。-20℃避光保存，有效期1年。

3.3.2 西地那非標(biāo)準(zhǔn)工作液（10 μg/mL）：精密移取適量西地那非標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.0 mg/mL）（3.3.1）分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。-20℃避光保存，有效期3個(gè)月。

3.3.3 他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（0.5 mg/mL）：精密稱(chēng)取適量他達(dá)拉非參考物質(zhì)（3.2），用甲醇（3.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為0.5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。-20℃避光保存，有效期1年。

3.3.4 他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)工作液（10 μg/mL）：精密移取適量他達(dá)拉非標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（0.5mg/mL）（3.3.3）分別置于10 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。-20℃避光保存，有效期3個(gè)月。

3.4 材料

他達(dá)拉非膠體金免疫層析試劑盒及配套的試劑（可選），適用基質(zhì)為保健食品。